STEMCELL又开直播啦！自4月起，我们陆续上线了一波网络小课堂，涵盖类器官、多能干细胞、免疫学多个研究领域。第一期的类器官专题收到了大家的踊跃报名与参与，讲座中，很多老师都提出了干细胞培养、基因组编辑以及干细胞来源的类器官的相关问题，因此，本期我们将为大家带来STEMCELL网络小课堂第二讲 – 干细胞专题！
人多能干细胞（Human Pluripotent Stem Cell, hPSC）自诞生以来取得了显著的进展，极大地推动了发育机制、疾病模型、药物筛选以及再生医学等领域的研究。STEMCELL的科学家们将为大家带来一系列关于hPSC的网络小课堂，内容涵盖基因组编辑、高质量培养体系的建立、下游分化、脑类器官构建到神经疾病建模。
讲座时间：
5月14日，星期四，上午9：30 – 10：30
Nucleic Acids Research文献分享：hPSC基因组编辑阐明新蛋白的生物学功能
主讲人：梁贺博士
5月15日，星期五，上午9：30 – 10：30
hPSC来源的神经疾病建模及脑类器官的构建
主讲人：张博雅博士
报名通道现已开启！扫描下方二维码关注STEMCELL官方微信，回复“报名”，即可参与！
主讲人介绍：
梁贺，Ph.D
应用科学家，多能干细胞，STEMCELL Technologies
梁贺博士毕业中国科学院上海生命科学研究院。相关研究发表于CELL RES., CIRC RES.等。曾以课题负责人身份获得国家自然科学基金青年项目，具有丰富的hPSC培养及心血管分化经验。
张博雅，Ph.D
应用科学家，多能干细胞，STEMCELL Technologies
张博雅博士毕业于复旦大学张素春教授、胡宝洋研究员实验室。相关研究以第/共同一作者发表于NAT COMMUN., CELL RES.，CELL DEATH DIS.等，具有丰富的神经分化及脑类器官构建经验。
主要内容：
梁贺博士将会分享新近发表在《Nucleic Acids Research》的研究论文 “FAM46B is a prokaryotic-like cytoplasmic poly(A) polymerase essential in human embryonic stem cells”，介绍结构生物学与细胞生物学交叉合作，通过对hPSC基因组编辑，阐明解析出结构的新蛋白的生物学功能的研究工作，并分享该合作研究背后的故事。
张博雅博士将会分享如何建立高质量的hPSC培养体系及下游神经分化流程，包括脑类器官的发展和构建，以及如何使用hPSC分化的神经培养体系（包括脑类器官）进行神经相关疾病的建模，如神经炎症反应、小胶质瘤及病毒感染。
高质量的hPSC培养体系，基质应如何选择？
上一期我们介绍了高质量的hPSC培养体系应该包括：稳定的pH，稳定的组分（尤其是FGF2），清晰明确的hPSC克隆形态，hPSC向三谱系分化的潜能以及培养过程中遗传物质的稳定，了解更多请查看我们的往期推送“定义hPSC培养新标准，全面提升hPSC培养质量”。今天小编就来跟大家聊一聊如何选择hPSC培养中的基质。
众所周知，使用feed-free培养体系维持培养hPSCs时，需要用基质包被培养板从而支持细胞的附着和扩增，虽然大家最常使用的基质是Matrigel®，但Matrigel®来从富含胞外基质蛋白的小鼠的EHS肿瘤中提取的基底膜基质，含有多种蛋白成分，但目前成分并不明确，且由于制备方法的特殊性，批次间的差异较大。因此使用Matrigel®无法构建成分明确且无异种成分的hPSC培养体系，而随着现在hPSC临床应用越来越广泛，业界对于hPSC培养体系的要求也变得越来越严格，因此寻找适合的替代Matrigel®、成分明确且无异种成分的hPSC培养基质至关重要。
CellAdhere™ Laminin-521
Laminin，层粘粘蛋白，又称板层素，它是构成细胞间质的一种非胶原糖蛋白，生物功能是细胞黏着与基质的介质，目前已被广泛应用于hPSC的维持培养中。与Laminin-511相比，Laminin-521的效果更好，尤其是在低密度培养体系中。
值得一提的是，相比于其它基质，在化学成分确定的培养体系下，Sergey Rodin等发表的文献证实，CellAdhere™ Laminin-521可提升单细胞的贴壁和存活，接种中不需要加入额外的凋亡抑制剂（如Rock inhibitor）（见图1，2），此种培养方法已在Nature Protocol上发表。从图1，2的实验结果可以看出，CellAdhere™ Laminin-521作为化学成分确定的hPSC培养基质，在低密度条件下，效果更优于Matrigel®，为Matrigel®强有力的替代品，可广泛用于成分确定的hPSC培养体系。
图1. 将hPSC进行单细胞铺板，在不添加Rock inhibitor Y-27632的条件下，与Matrigel（Mg）相比，Laminin-521（LN-521）可以更好的促进hPSC的生长
图片引用自 Clonal culturing of human embryonic stem cells on laminin-521/E-cadherin matrix in defined and xeno-free environment.
图2. hPSC单细胞铺板24h后，与Matrigel（Mg）相比，Laminin-521（LN-521）可以更好的促进hPSC的存活，无论是否添加Rock inhibitor Y-27632
图片引用自 Clonal culturing of human embryonic stem cells on laminin-521/E-cadherin matrix in defined and xeno-free environment.
Vitronectin XF™
除了Laminin-521，Vitronectin XF™也是化学成分确定的hPSC培养基质，在Vitronectin XF™中培养的hPSCs保留了多能性和正常的集落形态，且无需进行驯化的步骤。
图3. 使用以TeSR™-E8™，培养于Vitronectin XF™和Matrigel®上的hES和iPS的形态比较
使用Vitronectin XF™基质所培养的集落比使用Matrigel®的更为稠密，且圆形的形态更明显，而使用Matrigel®培养的集落则较为分散，且形状较不规则。
下面这些文献都使用了Vitronectin XF™进行hPSC培养哦！
1. Cell cycle (Georgetown, Tex.) 2016 JAN，Non-integrating episomal plasmid-based reprogramming of human amniotic fluid stem cells into induced pluripotent stem cells in chemically defined conditions.
2. Stem Cell Reviews and Reports 2016 AUG，Functionalizing Ascl1 with Novel Intracellular Protein Delivery Technology for Promoting Neuronal Differentiation of Human Induced Pluripotent Stem Cells
3. Nature methods 2011 MAY，Chemically defined conditions for human iPSC derivation and culture.
4. Stem cells and development 2010 AUG，Roles of integrins in human induced pluripotent stem cell growth on Matrigel and vitronectin.
想要查看更多Vitronectin XF™和Matrigel®比较的数据，请至STEMCELL微信公众号回复“数据比较”。
综上所述，与Matrigel®相比，CellAdhere™ Laminin-521和Vitronectin XF™二者成分完全确定，该体系可以对整个培养环境进行完全的控制，使细胞群更具一致性，且在下游应用中的可重复性高。
相关产品
产品名称
产品号 #
mTeSR™ Plus
05825
CellAdhere™ Laminin-521
77003
Vitronectin XF™
07180
活动预告
STEMCELL将于近期推送一系列线上公开课，还有免疫学专题即将上线，敬请期待！
想要获得更多关于类器官的相关信息？请大家移步我们的干细胞技术资源中心进行查看！
STEMCELL又开直播啦！自4月起，我们陆续上线了一波网络小课堂，涵盖类器官、多能干细胞、免疫学多个研究领域。第一期的类器官专题收到了大家的踊跃报名与参与，讲座中，很多老师都提出了干细胞培养、基因组编辑以及干细胞来源的类器官的相关问题，因此，本期我们将为大家带来STEMCELL网络小课堂第二讲 – 干细胞专题！
人多能干细胞（Human Pluripotent Stem Cell, hPSC）自诞生以来取得了显著的进展，极大地推动了发育机制、疾病模型、药物筛选以及再生医学等领域的研究。STEMCELL的科学家们将为大家带来一系列关于hPSC的网络小课堂，内容涵盖基因组编辑、高质量培养体系的建立、下游分化、脑类器官构建到神经疾病建模。
讲座时间：
5月14日，星期四，上午9：30 – 10：30
Nucleic Acids Research文献分享：hPSC基因组编辑阐明新蛋白的生物学功能
主讲人：梁贺博士
5月15日，星期五，上午9：30 – 10：30
hPSC来源的神经疾病建模及脑类器官的构建
报名通道现已开启！扫描下方二维码关注STEMCELL官方微信，回复“报名”，即可参与！
主讲人介绍：
梁贺，Ph.D
应用科学家，多能干细胞，STEMCELL Technologies
梁贺博士毕业中国科学院上海生命科学研究院。相关研究发表于CELL RES., CIRC RES.等。曾以课题负责人身份获得国家自然科学基金青年项目，具有丰富的hPSC培养及心血管分化经验。
张博雅，Ph.D
应用科学家，多能干细胞，STEMCELL Technologies
张博雅博士毕业于复旦大学张素春教授、胡宝洋研究员实验室。相关研究以第/共同一作者发表于NAT COMMUN., CELL RES.，CELL DEATH DIS.等，具有丰富的神经分化及脑类器官构建经验。
梁贺博士将会分享新近发表在《Nucleic Acids Research》的研究论文 “FAM46B is a prokaryotic-like cytoplasmic poly(A) polymerase essential in human embryonic stem cells”，介绍结构生物学与细胞生物学交叉合作，通过对hPSC基因组编辑，阐明解析出结构的新蛋白的生物学功能的研究工作，并分享该合作研究背后的故事。
高质量的hPSC培养体系，基质应如何选择？
上一期我们介绍了高质量的hPSC培养体系应该包括：稳定的pH，稳定的组分（尤其是FGF2），清晰明确的hPSC克隆形态，hPSC向三谱系分化的潜能以及培养过程中遗传物质的稳定，了解更多请查看我们的往期推送“定义hPSC培养新标准，全面提升hPSC培养质量”。今天小编就来跟大家聊一聊如何选择hPSC培养中的基质。
众所周知，使用feed-free培养体系维持培养hPSCs时，需要用基质包被培养板从而支持细胞的附着和扩增，虽然大家最常使用的基质是Matrigel®，但Matrigel®来从富含胞外基质蛋白的小鼠的EHS肿瘤中提取的基底膜基质，含有多种蛋白成分，但目前成分并不明确，且由于制备方法的特殊性，批次间的差异较大。因此使用Matrigel®无法构建成分明确且无异种成分的hPSC培养体系，而随着现在hPSC临床应用越来越广泛，业界对于hPSC培养体系的要求也变得越来越严格，因此寻找适合的替代Matrigel®、成分明确且无异种成分的hPSC培养基质至关重要。
Vitronectin XF™
除了Laminin-521，Vitronectin XF™也是化学成分确定的hPSC培养基质，在Vitronectin XF™中培养的hPSCs保留了多能性和正常的集落形态，且无需进行驯化的步骤。
图3. 使用以TeSR™-E8™，培养于Vitronectin XF™和Matrigel®上的hES和iPS的形态比较
下面这些文献都使用了Vitronectin XF™进行hPSC培养哦！
1. Cell cycle (Georgetown, Tex.) 2016 JAN，Non-integrating episomal plasmid-based reprogramming of human amniotic fluid stem cells into induced pluripotent stem cells in chemically defined conditions.
2. Stem Cell Reviews and Reports 2016 AUG，Functionalizing Ascl1 with Novel Intracellular Protein Delivery Technology for Promoting Neuronal Differentiation of Human Induced Pluripotent Stem Cells
3. Nature methods 2011 MAY，Chemically defined conditions for human iPSC derivation and culture.
4. Stem cells and development 2010 AUG，Roles of integrins in human induced pluripotent stem cell growth on Matrigel and vitronectin.
想要查看更多Vitronectin XF™和Matrigel®比较的数据，请至STEMCELL微信公众号回复“数据比较”。
综上所述，与Matrigel®相比，CellAdhere™ Laminin-521和Vitronectin XF™二者成分完全确定，该体系可以对整个培养环境进行完全的控制，使细胞群更具一致性，且在下游应用中的可重复性高。
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CellAdhere™ Laminin-521 |
77003 |
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Vitronectin XF™ |
07180 |